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全光譜分光光度計的使用技巧

更新時間:2019-04-03      點擊次數(shù):1511
   全光譜分光光度計的使用技巧
  全光譜分光光度計其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同。酶標(biāo)儀從原理上可以分為光柵型酶標(biāo)儀和濾光片型酶標(biāo)儀。光柵型酶標(biāo)儀可以截取光源波長范圍內(nèi)的任意波長,而濾光片型酶標(biāo)儀則根據(jù)選配的濾光片,只能截取特定波長進(jìn)行檢測。
  全光譜分光光度計主要檢測葡萄酒中有害元素及營養(yǎng)元素。幾乎可以檢測化學(xué)周期表中所有的金屬元素,用石墨爐時的檢測能力可達(dá)10ˉ9數(shù)量級,等同于2個半籃球場中有1粒沙大小的金屬元素,它都能檢測出來。近年來共檢測出葡萄酒等59批次鎘、鐵、銅、錳元素超標(biāo)的不合格產(chǎn)品。
  全光譜分光光度計的使用技巧
  一、主要項目對分析結(jié)果的影響
  1)波長準(zhǔn)確度
  分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對應(yīng)于樣品吸收光譜中的某一個吸收峰的波長。由于儀器的制造和調(diào)整誤差,單色光的實際波長與儀器的波長讀數(shù)值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度,對波長準(zhǔn)確度要求允許寬些。但是,當(dāng)吸收峰寬度較小,而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直,此時波長準(zhǔn)確度的影響就必須引起注意。
  2)透射比(吸光度)準(zhǔn)確度
  很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
  3)雜散光
  雜散光是由于光學(xué)元件制造誤差以及光學(xué)和機械零件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光,隨著樣品濃度的增加,雜散光的影響也隨之增大,將給分析結(jié)果帶來一定的誤差。在紫外的短波區(qū)域光源強度和檢測器的靈敏度均明顯減弱,雜散光的影響更不能忽視。因此,雜散光的大小也是儀器性能的一項重要指標(biāo)。
  使用與維護(hù)
  1)若大幅度改變測試波長,需稍等片刻,等燈熱平衡后,重新校正“0”和“100%”點。然后再測量。
  2)指針式儀器在未接通電源時,電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況,需進(jìn)行機械調(diào)零。
  3)比色皿使用完畢后,請立即用蒸餾水沖洗干凈,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,影響比色皿的透光率。
  4)操作人員不應(yīng)輕易動燈泡及反光鏡燈,以免影響光效率。
  5)由于其光電接收裝置為光電倍增管,它本身的特點是放大倍數(shù)大,因而可以用于檢測微弱光電信號,而不能用來檢測強光。否則容易產(chǎn)生信號漂移,靈敏度下降。針對其上述特點,在維修、使用此類儀器時應(yīng)注意不讓光電倍增管長時間暴露于光下,因此在預(yù)熱時,應(yīng)打開比色皿蓋或使用擋光桿,避免長時間照射使其性能漂移而導(dǎo)致工作不穩(wěn)。
  6)放大器靈敏度換擋后,必須重新調(diào)零。
  7)比色杯的配套性問題。比色杯必須配套使用,否則將使測試結(jié)果失去意義。在進(jìn)行每次測試前均應(yīng)進(jìn)行比較。具體方法如下;分別向被測的兩只杯子里注入同樣的溶液,把儀器置于某一波長處,石英比色杯;220nm、700nm裝蒸餾水,玻璃比色杯:700nm處裝蒸餾水,將某一個池的透射比值調(diào)至100%,測量其他各池的透射比值,記錄其示值之差及通光方向,如透射比之差在±0.5%的范圍內(nèi)則可以配套使用,若超出此范圍應(yīng)考慮其對測試結(jié)果的影響。

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